一、开机程序

1.1首先制备新鲜流动相和清洗液(详见细则)。

1.2打开网络集线器电源。

1.3打开计算机电源，进人Windows操作系统。

1.4打开BSM和SM电源，待通过自检后。

1.5登录Empower软件，进人运行样品界面。

1.6打开控制台界面(图标图在SM界面右下角)。

1.7进行仪器的Start up操作(详见细则)。

1.8设定O.lml/min-0.2m1/min流速，冲洗检测池。

1.9当检测池出口有液体流出后，打开TUV(PDA)检测器电源。

1.10待检测器通过自检以后，在控制台界面RESET检测器。

1.11编制仪器方法，监测基线，准备开始超高效液相色谱分析实验。

二、开机细则

2.1制备新鲜流动相和清洗液。

2.1.1超高效液相色谱对流动相的要求:

  ●有机溶剂要求用色谱纯(进口名牌最好);

      ●.水或缓冲盐溶液要用超纯水(18.2MΩ),当天制备。

2.1.2超高效液相色谱对洗针液的要求:

  ●强洗针液用较高比例的甲醇/水或乙腈/水(例如:80/20) ;

  ●弱洗针液用纯水或含少量甲醇或乙腈的水溶液(例如:10%甲醇溶液)。

2.1.3清洗柱塞密封垫(Seal Wash)的溶液:

  ●含5%-10%甲醇的超纯水;

   *特别提示: 以上溶剂或溶液均需:

  ●用0.22 µm的膜过滤并脱气;

  ●用洁净的玻璃容器盛放，避免污染。

2.2超高效液相色谱Start Up操作。

2.2.1首先灌注柱塞杆清洗液(Prime Seal wash):

  ●选择Control>Prime Seal wash，点击之;至出口管有液体滴出即可停止灌注;*提示:为避免污染，请勿循环使用Seal wash清洗液2.2.2第二步湿灌注(Wet Priming) BSM(二元溶剂管理器):选择Control>Prime A/B Solvents，点击之;选择A1(或A2), Bl(或B2)，时间设定为3分钟，点击start;

  ●Prime时的流速已设定为:A泵和B泵各4m1/min，总流速为8 ml/min，无需改动。

2.2.3做过BSM的wet prime之后，要准备SM样品管理器灌注SM注射器和进样针操作;选择Sample Manager，单击Control>Prime syringes;选择“Sample syringe and wash syringes”;在Number of cycles中输入要作灌注的次数(默认值为1);(建议:如果更换溶剂，做5-7次灌注);

  ●单击OK。当系统状态是“Idle(待机)”，就表示灌注做完了;

  ●接下来做冲洗进样针;

  ●在控制台的Sample Manager窗口，单击Control>Wash Needle,出现Wash Needle对话框;

  ●输入需要的强洗针液的体积。默认为:0.0 uL在弱洗针框中输人弱洗针液的体积，默认值:200.0 μL ,建议值:200到500 μL;

  ●单击OK，开始洗针过程;

  ●当洗针过程完成时，回到“Idle'’状态;

   提示:不要使用缓冲盐作为洗针液。

2.2.4样品制备

   用流动相溶样;

   用0.22μm样品过滤膜过滤;

   放人超高效液相色谱适用的样品瓶;

   提示:不要使用非Waters指定的样品瓶，以免损坏进样针。

三、关机操作

 3.1用超纯水置换缓冲盐流动相，清洗色谱柱及系统(100倍柱体积);

 3.2待系统中缓冲盐冲洗干净，用乙腈/水冲洗系统;

 3.3用纯有机溶剂(乙腈或甲醇)充满系统;

 3.4缓慢降低流速至零，关闭TUV/PDA检测器电源，关闭SM, BSM电源;

 3.5关闭网络集线器电源;

 3.6退出Empower软件，关计算机。