水平电泳系统操作规程
一、仪器名称
水平电泳系统
二、规格型号
Power Pac电泳仪电源,Sub-Cell浸没式水平电泳槽
三、生产商
美国Bio-Rad Laboratories Ltd.公司
四、操作规程
1.缓冲液:核酸分离一般使用连续缓冲液,常用TBE buffer与TAE buffer。
2.凝胶:以上述缓冲液配制琼脂糖凝胶,沸水浴或微波炉加热使之融化,冷却至55℃时加人溴化乙锭(EB)至终浓度为0.5 ug/L,在制胶盘中铺制凝胶,注胶时梳齿下端距底部约lmm,待凝胶凝固后轻轻取出流子,凝胶移入电泳槽中,加缓冲液使凝胶浸没于液面下lmm。
3.加样:待电泳的核酸样品可加电泳指示染料(常用0.025 %溴酚蓝)。每样品孔可加样5-10 ug,微量移液器加样。盖上电泳槽安全盖。
4.电泳仪加电:插上电泳仪电源,打开后部开关,主板指示灯亮
5.电泳仪参数设置:按下主面板上【V/A Constant】按钮,进行恒压或恒流模式选择。可通过【+]和【一】按钮调节电压或电流数值至需要值。
6.连接电泳槽电源线:红色线插红色接口,黑色线插黑色接口。
7.电泳:按下【Run/Pause】按钮,开始电泳电泳过程中按下【V/mA/Time】按钮可以显示当前运行的电流/电压/时间参数,按下【Run/Pause】暂停或继续电泳。
8.电泳结束:DNA样品或染料在凝胶中迁移足够距离后,按下【Stop】停止电泳,关上电源,拔出电极插头,打开电泳槽盖。
★注意事项
1.电泳仪技术参数如下,设置电泳仪参数不可超过额定值:最大电压300V最大电流400mA最大功率75W最大时间999min
2.电源线正负极不要接反,红色线插红色接口,黑色线插黑色接口。
3.电泳槽放置时必须是电源线的一面朝上放置,以免向下放置时折断电源线。
4.电泳仪可同时接4个电泳槽,如同时接多个电泳槽,应同时接上开始电泳。
5.防止紫外线对皮肤及眼晴的损伤,避免紫外线直接照射皮肤与眼睛。
6. EB是强诱变列,有致癌性,操作时须带手套,防止污染。所有含有EB的物品在弃置前必须进行净化处理。
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