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《组织学与胚胎学》实验大纲
课程编号：01sy3
课程性质：独立设课
课程类别：必修课
学时学分：实验学时6实验学分1
先修课程：人体解剖学、细胞生物学
适用专业：对外中医传统班专业
开课单位、教研室：基础医学院 组胚教研室
实验项目总数 2 其中综合性、设计性实验项目数 2
实验目的与要求
1．通过组织学验证性实验，培养学生熟练使用显微镜的技能以及组织学绘图技能，熟悉数码互动实验室的组成和操作；
2．通过组织学验证性实验，掌握数码互动实验显微镜的使用，通过观察显微镜下正常人体的各器官和细胞的微细结构，验证和巩固理论课知识的认识，加深对理论课知识的理解，掌握正常人体的微细结构；
3．通过组织学的综合性实验，掌握形态学常用技术的实验操作方法以及动物实验的基本操作，培养学生的形态学实验操作能力，学会在实践中自我发现问题、分析问题和独立解决问题的能力，逐步树立良好的科学作风；
4．通过模型和各种视频的学识，掌握人体胚胎早期发育过程的结构变化（空间和时间上的变化特点）。
实验教材：《组织学与胚胎学实验教程》（中国中医药出版社）和自编教材
教学目的和内容
第一次实验显微镜的构造和使用
【实验目的】
1．掌握光学显微镜的构造以及正确使用光学显微镜的方法，熟悉数码互动实验室的组成和操作方法；
2．加强对观察标本应注意事项的理解；
3．熟悉显微镜的维护和清洁；
4．了解组织学石蜡切片标本的制备过程；
5．了解形态学实验室的注意事项和要求。
【实验内容】
l．一般光学显微镜的结构、正确使用方法以及维护清洁的介绍，数码互动实验室组成和操作的介绍；
2．应用普通光学显微镜如何从低倍镜到高倍镜观察组织切片的步骤介绍；
3．组织学石蜡切片标本制备过程（取材与固定、脱水与包埋、切片与染色、封片和保存过程）的初步介绍；
4．切片标本观察过程中的注意事项介绍；
5．数码互动实验室的注意事项和要求的介绍。
第一次实验 综合性实验2-肥大细胞形态观察和巨噬细胞吞噬实验
【实验目的】
通过该实验掌握对疏松结缔组织光镜结构，同时通过结构特点加深对肥大细胞和巨噬细胞功能的理解，并学会制作铺片。
【实验内容】
1． 实验动物：小白鼠（雌性或雄性均可，体重20-22g）
1. 实验仪器和器材：注射器、天平、烧杯、分离针、镊子、剪刀、手术刀、蜡盘、染色缸、载玻片、盖玻片、光学显微镜等
2. 实验试剂：0.5%台盼蓝生理盐水溶液、苏木精染液、0.5%伊红染液、甲苯胺蓝染液、生理盐水、无水酒精、二甲苯、10%福尔马林溶液、中性树胶。
3. 配制甲苯胺蓝染液：苯胺油2ml倒入蒸馏水50ml，加热煮沸，混匀冷却（至40~50°C）放入甲苯胺蓝1g，待溶后加无水酒精50ml，半小时后即可使用。
【实验步骤】
１.腹腔注射与制作小鼠肠系膜铺片
（1）小鼠腹腔注射0.5-1ml/20g体重的0.5%台盼蓝水溶液，每隔一天注射一次，至耳部和尾部皮肤颜色呈蓝色为止。
（2）制作小鼠肠系膜铺片：麻醉后脱臼处死小白鼠，腹部朝上，分别将肢端以大头针固定在蜡盘上，打开腹腔暴露肠管，于肠管间轻轻拉出肠系膜，剪切置于载物片中央，用分离针轻轻铺平，完成肠系膜铺片。
2．染色：全部标本分为两组，一组显示巨噬细胞，另一组显示肥大细胞。
（1）巨噬细胞染色
（2）甲苯胺蓝染色显示肥大细胞
3.普通光学显微镜观察：将中性树脂封片的肠系膜铺片置于普通显微镜下观察。
实验主要仪器设备试剂
1．主要仪器设备：数码互动实验设备、电脑、医用采血针、酒精棉球、载玻片、盖玻片、记号笔、棕色小口瓶、研钵、玻璃棒、Motic光学显微镜、注射器、天平、烧杯、分离针、镊子、剪刀、手术刀、蜡盘、染色缸、轮式切片机等。
2.实验试剂：0.5%台盼蓝生理盐水溶液、苏木精染液、0.5%伊红染液、甲苯胺蓝染液、生理盐水、无水酒精、二甲苯、10%福尔马林溶液、瑞氏染液、生理盐水、蒸馏水、医用酒精棉球或碘酒棉球、磷酸盐缓冲液、中性树胶、甲醇等
第二次实验 综合性实验1-血涂片标本的制作和血细胞的形态学观察
【实验目的】
通过学生自己动手制作血涂片, 并在显微镜下观察各种血细胞，使学生熟悉血涂片制作的基本步骤和操作技术, 丰富形态学实验教学内容, 提高学生的学习兴趣和动手操作能力，掌握形态学实验技术。
【实验内容】
1.实验动物：健康成人或有过敏史的成人，大鼠或兔子
2.实验仪器和器材：医用采血针、酒精棉球、载玻片、盖玻片、记号笔、棕色小口瓶、研钵、玻璃棒、Motic光学显微镜等
载玻片的处理
一般将载玻片用微波清洗后，再经清洁液浸泡过夜，用流水反复冲洗，最后入95%酒精浸泡约1小时，用洁净绸布擦干备用。或者选用已经经过处理的载玻片和盖玻片。
3.实验试剂：瑞氏染液、生理盐水、蒸馏水、医用酒精棉球或碘酒棉球、磷酸盐缓冲液、中性树胶、二甲苯、酒精、甲醇等
瑞氏(Wright)染液的配制
瑞氏染料粉剂 0.1g
甲醇 60ml
将粉剂放入洁净干燥研钵内，滴加甲醇研磨至全溶，密封于棕色小口瓶内，放置1/2-1个月即可使用。
【实验步骤】
- 血涂片的制作：首先由实验课教师讲解并示教， 最后由学生进行实际操作。
（1）涂片
（2）染色
（3）冲洗
（4）封片
2．血细胞的观察：将中性树胶封片后的玻片置于显微镜下进行观察。
实验考核方式
1．实验绘图成绩评分。
2．实验课堂提问考查评分。
实验项目汇总及课时分配
|
序号 |
实验项目名称 |
计划学时 |
实验类型 |
每组人数 |
项目 类别 |
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验证性 |
综合性 |
设计性 |
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必做 |
选做 |
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1 |
显微镜的使用、疏松结缔组织铺片 |
3 |
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√ |
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20 |
√ |
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2 |
血液 |
3 |
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√ |
|
20 |
√ |
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合计数 |
6 |
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6 |
0 |
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6 |
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